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详细介绍
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | #K0709-01-2 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药,综合 |
novocib：PRECICE® HPRT Assay Kit 货号：#K0709-01-2
24 analyses (8 samples in triplicate) with HPRT enzyme
PRECICE® HPRT 检测试剂盒提供了第一个用于测量 HPRT 活性的非放射性方案，采用方便的 96 孔板形式。
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 （HPRT， EC 2.4.2.8） 是嘌呤补救途径的关键酶，由高度可变的 HPRT1 基因编码。已描述与人类遗传疾病相关的 HPRT1 基因中有 300 多种突变导致 HPRT 酶部分或全缺乏。完*性 HPRT 缺乏症是一种罕见的人类遗传病，也称为 Lesch-Nyhan 综合征。在某些情况下，痛风，更常见的嘌呤紊乱，也可能继发于 HPRT 缺乏症（Ceballos-Picot I. 等人，2010 年）。HPRT1 基因的高变异性使基因检测复杂化。目前，使用放射性标记的 14C-次黄嘌呤在色谱测定中测试红细胞裂解物中的 HPRT 酶功能 （Cartier， P. et al， 1968）。
原理：
通过追踪 IMP 脱氢酶氧化的 IMP 的产生来测量 HPRT 活性。这个过程导致 NADH2 的形成，在 340 nm 处通过分光光度法连续监测以进行实时测量。
检测 6.75 nmol/h/ml 至 340 nmol/h/ml 的 HPRT 活性，能够表征*全和部分缺陷。
测量不精确度：1.5%（运行内）、5%（日间）和 6.5%（总计）。
在 2 小时内同时分析多达 15 个样品，一式三份。
无需样品制备或事先灭活细胞 5'-核苷酸酶。细胞裂解物直接用于连续监测 HPRT 活性。
通过 PRECICE® HPRT 检测试剂盒测量的红细胞、PBMC 和培养细胞裂解物中 HPRT 的比活性与先前通过放射化学程序获得的活性相当。
| Cells | PRECICE® HPRT Assay Kit | Published Data | References |
|---|---|---|---|
| RBC specimen 1 (n=4) | 76.94±2.5 nmol/h/mg of Hgb | 80–120 nmol/h/mg of hemoglobin | 4 |
| RBC specimen 2 (n=12) | 78.03±5.52 nmol/h/mg of Hgb | ||
| RBC specimen 3 (n=4) | 88.7±3.41 nmol/h/mg of Hgb | ||
| PBMC specimen 1 (n=4) | 159.91±3.60 nmol/h/mg of protein 19.7±0.6 nmol/h/106 PBMC | 343±18 nmol/h/mg of protein 10.2–18.0 nmol/h/106 PBMC | 4 |
| PBMC specimen 2 (n=4) | 152.30±4.94 nmol/h/mg of protein 21.3±0.42 nmol/h/106 PBMC | 5 | |
| Human Dermal Fibroblasts (Invitrogen) | 70.91±2.67 nmol/h/mg of protein | 81–127 nmol/h/mg of protein | 6 |
| W20-17 cells (ATCC) | 91.95±4.49 nmol/h/mg of protein |
每小时 340 nm 处吸光度增加的速率与人重组 HPRT 酶浓度的函数关系（NovoCIB，参考文献 E-Nov-9）。在*全反应混合物中稀释至最终血红蛋白浓度 1mg/ml （n=4） 的 3 种不同对照溶血物对应的吸光度变化由实心方块、实心三角形和实心圆表示。插入片段显示，在 21 ng/ml 至 1.5 μg/ml 的整个重组 HPRT 范围内观察到线性相关性;单位相同。
Ablation of Atp5if1 impairs metabolic reprogramming and proliferation of T lymphocytes and compromises mouse survival
I. Romero-Carraminana, S. Dominguez-Zorita, P.B. Esparza-Molto, J. M. Cuezva (2024) iScience 27, 109863
Electron transport chain inhibition increases cellular dependence on purine transport and salvage
Z. Wu, D. Bezwada, F. Cai, J. Garcia-Bermudez, M. Ni, R.J. DeBerardinis, Cell Metab. 2024 Jun 7:S1550-4131(24)00190-6
Therapeutic gene correction for Lesch-Nyhan syndrome using CRISPR-mediated base and prime editing (2023)
G. Jang , H. Rim Shin, H.-S. Do , J. Kweon , S. Hwang , S. Kim, S. Hee Heo, Y. Kim, B. Lee Molecular Therapy - Nucleic Acids ; 31: 586-595.
Rescuing compounds for Lesch-Nyhan disease identified using stem cell-based phenotypic screening (2020)
V. Ruillier, J. Tournois, C. Boissart, M. Lasbareilles, G. Mahé, L. Chatrousse, M. Cailleret, M. Peschanski, A. Benchoua JCI Insight 5(4): e132094.
Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase and inosine 5'-monophosphate dehydrogenase activities in three mammalian species: aquatic (Mirounga angustirostris), semi-aquatic (Lontra longicaudis annectens) and terrestrial (2015)
M. Barjau Pérez-Milicua, T. Zenteno-Savín, D.E. Crocker, J.P. Gallo-Reynoso Front Physiol.; 6: 212.
Prolonged fasting increases purine recycling in post-weaned northern elephant seals
José Guadalupe So?anez-Organis, José Pablo Vázquez-Medina, Tania Zenteno-Savín, Andres Aguilar, Daniel E. Crocker, Rudy M. Ortiz J Exp Biol (2012) 215 (9): 1448-1455.
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